Metode MPN adalah metode mikrobiologi yang dalam penentuan hasil akhirnya menggunakan teori probabilitas dari data hasil positif-negatif. Brown (2001:224) memberi permisalan pembacaan tabung positif untuk kombinasi 3-1-0. Kombinasi ini menghasilkan indeks MPN sebesar 4,3. Angka ini menunjukkan sampel memiliki perkiraan 4,3 ‘organisme’ per gram dengan 95% kemungkinan keberadaannya dengan rentang 0,9 sampai 18,1 ‘organisme’ dengan menggunakan tabel MPN 3 seri. Angka 4,3 hanyalah nilai kemungkinan secara statistik.

Gambar 1. Bagan permisalan distribusi normal salah satu nilai MPN. Diambil dari dokumentasi pribadi.

FDA BAM appendix 2 (2001) memberikan informasi bahwa hasil dari metode MPN memiliki derajat kepercayaan karena proses perhitungannya merupakan hasil dari peluang. Arti dari 95% confidence intervals dalam tabel MPN adalah kemungkinan paling tidak 95% rentang derajat kepercayaan dari hasil akhir adalah sesuai dengan konsentrasi yang sebenarnya. Di dalam tabel MPN terdapat kolom derajat kepercayaan (confidence interval) 95% dengan batas bawah (lower limit) dan batas atas (upper limit). Angka ini menunjukkan batas derajat kepercayaan tersebut. Nilai indeks MPN dan derajat kepercayaan dalam tabel dinyatakan dalam dua digit signifikan, misalnya nilai 400 adalah hasil pembulatan antara 395 dan 405. Tidak diberikannya batas nilai MPN untuk semua tabung positif (3-3-3) yang ditandai dengan tanda “>” adalah menggambarkan konsentrasi lebih dari nilai MPN untuk kombinasi paling tidak ada satu tabung negatif pada pengenceran tertinggi (3-3-2). Ketidakpastian ini juga dijumpai pada indeks MPN untuk semua kombinasi tabung negatif (para. 7-12).

Tabel 1. Contoh potongan tabel MPN 5 seri tabung dengan inokulum 0,1g (mL), 0,01 g (mL) dan 0,001 g (mL). Diambil dari dokumentasi pribadi.

Untuk memahami peranan peluang dalam mendistribusikan sel sehingga menghasilkan tabung positif maka jumlah tabung positif (5-3-1) pada tabel dicoba untuk dirunut dan diilustrasikan kembali dalam proses penanamannya pada gambar berikut (dianggap bahwa nilai MPN/mL sama dengan ‘sel’/mL (GU/mL)). Namun perlu diingat, jumlah sel yang terambil tidak selalu seperti itu, semuanya adalah peluang dan angka yang didapat adalah angka yang kemungkinannya paling besar.

Gambar 2. Ilustrasi peluang saat penanaman dan pengenceran pada metode MPN. Satu titik menggambarkan satu ‘sel’ atau growth unit. Diambil dari dokumentasi pribadi.

Indra Pradhika, 2018.

Referensi :

Brown, A .E. (2001). Benson : Microbiological application, laboratory manual in general microbiology (Edisi ke-8). New York: Mc Graw Hill Companies.

FDA-BAM Appendix 2: Most Probable Number from Serial Dilution. (2001). Diperoleh dari: www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm109656.htm